上海siRNA荧光定量PCR实验技术服务 欢迎来电 上海朝瑞生物科技供应

来源: 网络整理 2020-02-14

每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代表Ct值。因此,上海siRNA荧光定量PCR实验技术服务,只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。同时,对于荧光PCR实验来说,CT值也是判读样品阴阳性的重要指标。

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有关转基因及其产品的安全性的争论在国内外愈演愈烈,各国政府纷纷出台一系列的政策、法规,要求对转基因作物进行标识,有些国家对转基因的比较低含量做了限定,其阈值大小从1-5%不等。这就要求必须对转基因及其产品进行检测。 常规的检测方法多采用PCR法,如PCR-凝胶电泳、PCR-ELISA等。这些方法普遍存在着PCR产物污染、特异性不高及速度慢等问题。荧光PCR技术是一种新近发展起来的检测技术,它的应用将从根本上解决这些问题。 1.收集了国内外商品化的转基因作物品种,并通过查阅有关文献及网站初步确定了各种作物的转基因构建图; 2.于反应体系中引入UNG去污染酶,建立了无污染荧光PCR扩增体系; 3.以植物内源基因18SrRNA为靶标,设计了特异性引物和荧光探针,建立了以18SrRNA基因的扩增与否来判断核酸提取质量好坏的方法; 4.以FAM荧光素为标记,建立了以35S、NOS、NPTⅡ、Pat、Bar、FMV和CryⅢa为筛选目标的转基因农作物荧光PCR定性检测体系; 5.分别以FAM和TET两种荧光素标记外源基因和内源基因,建立了转基因大豆及转基因玉米的荧光定量PCR检测体系。

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